Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). In vitro fertilisation, IVF


Среди всех семейных пар в России 15-20% страдают от бесплодия. Считается, что если в течение года регулярной половой жизни без контрацепции беременность не наступает, то можно говорить о бесплодии. Крайне важно правильно установить причину бесплодия 1 . Как правило, их сразу несколько. При принятии решения о возможном методе лечения бесплодия врачи учитывают возраст и индивидуальные особенности пациентов.
Бесплодие, связанное с гормональными причинами, зачастую успешно поддается лечению заместительными гормональными средствами. Однако при бесплодии, связанном с нарушением проходимости маточных труб и спайками в органах малого таза женщины, а также с мужским фактором бесплодия, традиционные методы лечения, как правило, неэффективны. В этом случае на помощь приходит относительно новый метод лечения бесплодия - вспомогательные репродуктивные технологии, в основе которых лежит метод экстракорпорального оплодотворения - ЭКО . Более «разговорное» обозначение этого метода - «искусственное оплодотворение», или зачатие in vitro, т.е. «в пробирке». Если уж быть до конца точными, экстракорпоральное («экстра» - «вне», «корпоральный» - «телесный»; т.е. «внетелесное») оплодотворение вовсе не обязательно осуществляется именно в пробирке. Но суть от этого не меняется: оплодотворение яйцеклетки сперматозоидом происходит вне женского организма! И лишь через двое-трое суток эмбрионы переносятся в матку (подробнее о технологии ЭКО см. ниже).

Итак, если зачатие ребенка традиционным способом (когда оплодотворение происходит в маточных трубах женщины спермой мужчины, попавшей туда в результате полового сношения) невозможно вследствие:
непроходимости или отсутствия маточных труб;
эндометриоза;
мужского фактора бесплодия (снижение подвижности сперматозоидов и количества сперматозоидов, вплоть до полного отсутствия сперматозоидов в эякуляте);
иммунологического фактора бесплодия -
и при условии, что предшествующие попытки преодолеть бесплодие в течение 12-18 месяцев оказались неэффективными, быть может, имеет смысл прибегнуть к возможностям, которые предоставляет ЭКО .

Необходимые условия для проведения ЭКО :
согласие обоих партнеров;
отсутствие на момент начала лечения признаков острых и хронических воспалительных процессов в половых органах женщины и мужчины;
отсутствие патологических изменений в полости матки;
отсутствие патологических образований в яичниках.

Перед процедурой необходимо тщательное обследование супругов - для повышения шансов наступления беременности и уменьшения риска возможных осложнений.

Для женщины предварительное обследование включает:
консультацию и осмотр гинеколога-эндокринолога;
ультразвуковое исследование; консультацию терапевта и других специалистов - по назначению лечащего врача;
кольпоскопию (исследование шейки матки);
обследование на инфекции: токсоплазмоз, цитомегалию, герпес, хламидиоз, сифилис, гонорею, гепатит A и B, мазок из влагалища на степень чистоты, бактериологический анализ отделяемого цервикального канала;
гормональное обследование.

Для мужчины предварительное обследование включает:
консультацию и осмотр андролога;
ультразвуковое исследование (при необходимости);
расширенную спермограмму с определением морфологии сперматозоидов, бактериологический анализ спермы, гормональное обследование, биохимическое исследование спермы (фруктоза, лимонная кислота, цинк).

Как это делается?

1. Стимуляция суперовуляции. В первый-третий день цикла женщина начинает принимать лекарственный препарат (например, меногон), стимулирующий активность яичников. Дело в том, что обычно за один цикл созревает одна яйцеклетка. Под влиянием стимулирующих препаратов созревает несколько яйцеклеток, а это увеличивает шансы на успех ЭКО . Развивающиеся фолликулы («пузырьки», в которых происходит созревание яйцеклетки) находятся под постоянным контролем: на основании данных УЗИ оценивается их размер, в крови определяется уровень эстрогенов, прогестерона и лютеинизирующего гормона 2 , оценивается состояние цервикальной слизи (т.е. слизи, находящейся в шейке матки). Обычно фолликулы достигают требуемых размеров в течение 8-10 дней, после чего женщине вводится гормон хорионический гонадотропин, обеспечивающий окончательное созревание яйцеклеток.
2. Извлечение яйцеклеток. Ультразвуковой датчик с прикрепленной к нему специальной пункционной иглой вводится во влагалище. Врач осторожно прокалывает самые большие фолликулы и собирает созревшие яйцеклетки. Вся процедура проводится амбулаторно. Во время сбора яйцеклеток женщина находится в состоянии легкого медикаментозного сна (для анестезии применяются вводимые внутривенно препараты, успокаивающие и расслабляющие нервную систему).
3. Получение сперматозоидов. Сперматозоиды либо извлекают из эякулята, либо, при отсутствии или недостаточном количестве сперматозоидов в эякуляте, их «добывают» непосредственно из яичка или из придатка яичка. Сперматозоиды не обязательно использовать сразу после извлечения из организма: их можно заморозить и хранить в специальных резервуарах - при этом после размораживания все их свойства восстанавливаются.
4. Сортировка яйцеклеток и сперматозоидов. Под микроскопом отбираются наиболее зрелые и качественные яйцеклетки. Сперматозоиды помещаются в водную среду, причем самые жизнеспособные и подвижные тут же «устремляются в плавание» (затем их вылавливают), а малоподвижные остаются на месте.
5. Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов. После того как яйцеклетки поживут 4-6 часов в инкубаторе, в специальных культуральных чашках с питательной средой, к ним подсаживают подготовленные сперматозоиды (причем на одну яйцеклетку приходится от 50 000 до 100 000 сперматозоидов). Сперматозоиды облепляют яйцеклетку и выделяют фермент, который помогает им проникнуть внутрь. «Стремятся» все, но получится это только у одного. Как только один из сперматозоидов оказывается внутри, срабатывает барьер, перекрывающий доступ оставшимся «на воле». Проникший внутрь сперматозоид (мужская гамета) и ядро яйцеклетки объединяются. Оплодотворение произошло - две клетки слились в одну. Клетка начинает делиться. Через 48-72 часа эмбрионы состоят из 4-8 клеток и готовы к переносу в организм женщины.
6. Перенос эмбрионов в полость матки проводят с помощью специального катетера. Для увеличения шансов на успех, как правило, вводятся 2-3 эмбриона. Эта процедура безболезненна. После успешного переноса врач назначает препараты, поддерживающие развитие эмбрионов (прогестерон, хорионический гонадотропин - ХГ). Через две недели определяют уровень ХГ в крови. Через три недели плодное яйцо можно увидеть с помощью УЗИ.

После переноса нескольких эмбрионов в полость матки возможно замораживание оставшихся и хранение их в течение длительного времени для последующего использования в том случае, если не удастся сохранить данную беременность. Использование замороженных эмбрионов позволяет женщине избежать повторной гормональной стимуляции яичников, равно как и процедуры пункции яичников.

Результативность процедуры ЭКО зависит от лаборатории, где ее осуществляют. В среднем в мире она составляет от 20 до 40%. Однако беременность при ЭКО имеет свои особенности. Во-первых, зачастую при женском бесплодии гормональные механизмы женской репродуктивной системы оказываются не в состоянии должным образом поддерживать беременность, и приходится в течение большей части, а то и всей беременности назначать соответствующую заместительную гормональную терапию. Тем не менее, остается повышенная вероятность самопроизвольного прерывания беременности. Во-вторых, после ЭКО чаще, чем обычно, наступает многоплодная беременность. Это связано с тем, что в полость матки переносят несколько эмбрионов, чтобы увеличить вероятность имплантации. Многоплодная беременность довольно часто (до 50% случаев) осложняется самопроизвольными выкидышами и преждевременными родами. Для того чтобы снизить вероятность невынашивания, после срока 10 недель беременности может производиться редукция «лишних» плодов (остановка развития плода путем пункции плодного мешка под контролем УЗИ).

Как видите, ЭКО представляет собой сложный многоступенчатый процесс, успех которого зависит от множества факторов.

История Луизы Браун

Супруги Браун (Великобритания) всегда хотели иметь детей. Мальчика и девочку. Но несмотря на все их усилия, миссис Браун никак не удавалось забеременеть. Как раз в это время английские врачи объявили о создании революционной методики преодоления бесплодия. Миссис Браун решила, что это - ее последняя надежда. Врачи взяли у нее из яичника яйцеклетку и оплодотворили ее в пробирке спермой, полученной от мистера Брауна. Убедившись, что с оплодотворенной яйцеклеткой все в порядке и она начала делиться, врачи переместили ее в матку миссис Браун. Спустя девять месяцев миссис Браун родила дочку, которую назвали Луизой.
До рождения Луизы Браун (в 1978 году) женщины с непроходимостью маточных труб и мужчины с недостаточным количеством сперматозоидов в сперме были обречены на бесплодие. Метод «зачатия в пробирке» дал шанс многим парам, ранее не имевшим надежды родить ребенка.
Развитие метода оплодотворения в пробирке началось с искусственного осеменения, первый успешный случай которого датируется 1799 годом, когда сперма мужа была введена его жене с помощью теплого шприца. Для многих рождение Луизы Браун было знаком того, что ученые зашли слишком далеко, что они вздумали равняться с Богом, вмешиваться в сам процесс творения.

«Узкие места» оплодотворения
Для того чтобы зачатие и последующее развитие беременности было успешным, необходимо, чтобы «сошелся пасьянс», составленный из множества «карт». Например:
в головном мозге должны вовремя образоваться и выделиться гормоны, стимулирующие развитие яйцеклетки;
образующаяся яйцеклетка должна быть «качественной» и не иметь хромосомных дефектов;
яйцеклетка должна созреть;
в головном мозге должно образоваться достаточное количество лютеинизирующего гормона, стимулирующего окончательное созревание яйцеклетки;
яйцеклетка должна успешно выйти из фолликула (момент овуляции);
маточная труба должна «поймать» яйцеклетку;
сперматозоиды должны живыми попасть во влагалище, быстренько через него пройти, преодолеть слизистый барьер шейки матки, добраться до маточной трубы и найти там яйцеклетку;
сперматозоиды должны суметь пробраться через оболочки яйцеклетки;
сперматозоид должен подвергнуться целому ряду биохимических превращений и «внедрить» свою ДНК (23 хромосомы) в яйцеклетку;
оплодотворенная яйцеклетка должна обладать способностью делиться;
только что образовавшийся эмбрион должен нормально делиться и развиваться;
по истечении трех дней после оплодотворения эмбрион должен достичь матки;
эмбрион должен превратиться в двухслойного зародыша;
этот зародыш должен «вылупиться» из своих оболочек;
эндометрий - выстилка стенки матки - должен быть готов к принятию зародыша;
зародыш должен «пристать» к стенке матки и «внедриться» в нее…
Затем следует череда таинственных и важных событий, связанных с последующим развитием ребенка.

Донорство яйцеклетки
Использование донорской яйцеклетки - эффективный метод лечения бесплодия у всех женщин, за исключением тех, у кого бесплодие вызвано тяжелым заболеванием матки. ЭКО с донорской яйцеклеткой может рекомендоваться женщинам, у которых собственные яйцеклетки низкого качества или их не удается получить при стимуляции яичников.
Процедура:
1. Женщина - донор яйцеклетки, выбранная бесплодной парой, подвергается тщательному всестороннему обследованию на предмет выявления инфекционных и генетических заболеваний.
2. Подписывается соглашение между всеми участвующими сторонами.
3. Бесплодная женщина-реципиент принимает препараты, подготавливающие эндометрий к принятию зародыша.
4. Зрелые донорские яйцеклетки извлекаются из яичника и в лабораторных условиях оплодотворяются сперматозоидами, полученными от партнера бесплодной женщины.
5. В течение трех дней эмбрионы развиваются «в пробирке», а затем переносятся в матку.

ИКСИ - ICSI - Introcytoplasmic sperm injection - введение сперматозоида в цитоплазму яйцеклетки
ИКСИ подразумевает введение одного сперматозоида непосредственно в яйцеклетку (а не помещение яйцеклеток и сперматозоидов в одну культуральную чашку с питательной средой). Для начала, как всегда при ЭКО , яичники женщины подвергают лекарственной стимуляции, затем извлекают из них яйцеклетки. Для введения сперматозоидов используют специальные микроскопы, иглы и оборудование для микроманипуляций. Сперматозоиды извлекаются из эякулята. В случае отсутствии сперматозоидов в эякуляте прибегают к разновидности метода ИКСИ, «добывая» сперматозоиды непосредственно из яичка (ТЕЗА) или из придатка яичка (МЕЗА).
Кому показано ЭКО с ИКСИ?
Всем парам с тяжелым мужским бесплодием, которые отказываются от инсеминации донорской спермой.
Процедура ИКСИ:
1. Зрелую яйцеклетку удерживают специальной пипеткой.
2. Единичный сперматозоид удерживается и обездвиживается тонкой и острой полой иглой.
3. Этой же иглой аккуратно прокалывают оболочку яйцеклетки и вводят ее в цитоплазму яйцеклетки.
4. Сперматозоид вводят в цитоплазму и аккуратно вынимают иглу.
ИКСИ обеспечивает большую вероятность оплодотворения и, по некоторым данным, наступления беременности, чем в целом при ЭКО . Это объясняется, в частности, тем, что к ИКСИ прибегают обычно пары с мужским бесплодием, при этом яйцеклетки отличаются хорошим качеством, а организм женщины - готовностью к вынашиванию беременности. Однако следует учитывать, что мужское бесплодие часто бывает связано с генетическими дефектами У-хромосомы, которые, разумеется, передаются потомству мужского рода. Это следует учитывать при выборе ИКСИ как метода вспомогательной репродукции, по возможности проводя соответствующие генетические исследования.
Частота рождения детей с грубыми пороками развития, зачатых методом ЭКО и ИКСИ, не выше, чем при обычном зачатии.

Донорство спермы
Инсеминация донорской спермой является эффективным методом лечения мужского бесплодия (надо отметить, однако, что недавно разработанный метод ИКСИ позволяет даже при очень низких показателях спермы, т.е. в тех случаях, когда раньше требовалось донорская сперма, все-таки добиться оплодотворения сперматозоидами мужа) или решением проблемы для одинокой женщины, которая планирует беременность.
Процедура:
1. Специалисты банка спермы тщательно обследуют всех доноров на предмет инфекционных заболеваний, таких как СПИД, гепатит и другие инфекции. Сперма замораживается и сохраняется 6 месяцев, по истечении которых подвергается повторному исследованию.
2. Донор выбирается согласно желаемым внешним признакам: этнической принадлежности, цвету глаз, волос, росту, весу, группе крови и т.п.
3. Замороженная донорская сперма извлекается из банка спермы и доставляется в специальном контейнере в медицинскую клинику, где планируется ее использование.
4. У женщины определяется момент овуляции (методов для определения овуляции много - самых разнообразных).
5. В день овуляции обработанная сперма, содержащая очищенную фракцию подвижных сперматозоидов, вводится в полость матки с помощью тонкого и мягкого катетера. Эта операция совершенно безболезненна.
6. Успех донорского осеменения зависит от возраста женщины и ее репродуктивного здоровья.

Как оценить «качество» эмбрионов
К сожалению, в мире нет единой принятой системы оценки «качества» зародыша. Как правило, учитываются следующие показатели: количество клеток, упорядоченность их расположения, степень фрагментации, толщина оболочек вокруг эмбриона и т.п.
Обычно качество зародыша оценивается не ранее чем через 48 часов после извлечения яйцеклетки. К этому сроку (к концу второго дня) должно быть не менее двух клеток, лучше, если эмбрион состоит из 3-4 клеток. Через 72 часа (к концу третьего дня) эмбрион должен состоять по крайней мере из 6 клеток, а лучше - из 7 и более. В целом больше шансов выжить у эмбрионов, состоящих из большего числа клеток, упорядоченно расположенных и при отсутствии фрагментации. Качество эмбрионов оценивается под микроскопом в ЭКО -лаборатории, что позволяет прогнозировать вероятность развития беременности после переноса эмбриона. Однако в данный процесс вмешивается еще множество факторов, которые на современном уровне развития науки невозможно учесть, поэтому полученные прогнозы не всегда сбываются.

Суррогатное материнство
Суррогатное материнство - способ преодоления бесплодия женщины, которая сама не может выносить и родить ребенка (в связи с отсутствием матки, привычным невынашиванием).
В этом случае яйцеклетка бесплодной женщины, оплодотворенная спермой ее мужа, вводится в матку женщины, способной выносить и родить ребенка. Биологическими родителями ребенка считается пара, давшая яйцеклетку и сперму для образования эмбриона, а женщина, выносившая их ребенка, получила название суррогатной («вспомогательной», «заменяющей» матери).
Первоначально суррогатными матерями чаще всего были родственницы бездетной пары, но в последнее время суррогатное материнство становится профессией - биологические родители платят деньги здоровой женщине, согласной на имплантацию и вынашивание чужого эмбриона.
Суррогатное материнство - самая сложная (и, соответственно, дорогостоящая) программа в составе ЭКО . Привлечение к рождению ребенка третьего человека, ставшее возможным в результате почти фантастического прогресса медицинской науки, дало возможность ощутить радость материнства женщинам, чье бесплодие раньше было непреодолимым, но одновременно поставило перед врачами и пациентами ряд новых этических и юридических проблем.

Оплодотворение искусственное - комплекс методов лечения бесплодия, включающий оплодотворение путем искусственного осеменения (введения в половые пути женщины спермы мужа или донора) и экстракорпоральное оплодотворение с последующей трансплантацией дробящихся эмбрионов в полость матки. В последние годы разрабатывают метод трансплантации женских и мужских половых клеток в просвет маточной трубы.

Искусственное осеменение (инсеминация) . В зависимости от методики введения спермы различают влагалищный, внутришеечный и внутриматочный методы искусственного осеменения. Влагалищный метод (введение спермы в заднюю часть свода влагалища) используют редко; он наиболее прост, но наименее эффективен, поскольку влагалищное содержимое может неблагоприятно действовать на сперматозоиды. Внутришеечный метод (введение спермы в канал шейки матки) также недостаточно эффективен в связи с возможностью образования антиспермальных антител в шеечной слизи. Наиболее эффективен внутриматочный метод - введение спермы в полость матки. Однако при титре антиспермальных антител в шеечной слизи более 1:32 они обнаруживаются и в полости матки; в подобных случаях перед введением спермы необходима неспецифическая десенсибилизирующая терапия.

Искусственное осеменение спермой мужа проводят по следующим показаниям: со стороны мужа - мочеиспускательного канала, отсутствие эякуляции, олигоспермия при нормальном строении и подвижности сперматозоидов; со стороны женщины - анатомические изменения шейки матки, не поддающийся лечению , наличие антиспермальных антител в шеечной слизи. Противопоказания у женщин: острые и хронические воспалительные заболевания половых органов, истинные эрозии и псевдоэрозии шейки матки.

Перед осеменением необходимо исследовать сперму мужа, исключить трубно-перитонеальные и маточные причины бесплодия . С целью установления времени овуляции и наличия желтого тела проводят тесты функциональной диагностики (см. Гинекологическое обследование ), определяют содержание лютеинизирующего гормона и прогестерона в крови. С помощью ультразвука выясняют диаметр доминантного фолликула (см. Яичники ).

Процедуру проводят с соблюдением правил асептики в положении женщины на гинекологическом кресле. Сперму мужа, полученную при мастурбации после воздержания от половых сношений не менее чем в течение 3 дней, набирают в пластмассовый шприц емкостью 1 мл . К шприцу присоединяют полиэтиленовый катетер (можно использовать подключичный катетер), который без фиксации шейки матки вводят в канал шейки или в полость матки за внутренний зев. Сперму в количестве 0,4 мл вводят в канал шейки или в полость матки. Для удержания спермы на шейку матки надевают колпачок, применяемый обычно с целью контрацепции ; женщина остается в положении лежа в течение 30 мин .

При неполноценной лютеиновой фазе менструального цикла после искусственного осеменения рекомендуется введение препаратов, стимулирующих развитие желтого тела (хорионический гонадотропин по 750 ME внутримышечно на 11, 13, 15, 17, 19 и 21-й дни цикла). При удлиненной фолликулярной фазе менструального цикла проводят стимуляцию созревания фолликула и овуляции (желательно под ультразвуковым контролем диаметра доминантного фолликула). Для этого назначают кломифенцитрат (клостильбегит) по 50-100 мг внутрь с 5-го по 9-й день менструального цикла и вводят 3000-4500 ME хорионического гонадотропина внутримышечно на 12-й день менструального цикла. Обязательным условием наблюдения после искусственного оплодотворения является измерение базальной (ректальной) температуры или определение содержания b -субъединицы хорионического гонадотропина в крови с целью ранней диагностики беременности.

Искусственное осеменение спермой донора осуществляют при азооспермии у мужа (абсолютное показание), а также при олиго- и астеноспермии у мужа в сочетании с морфологическими изменениями сперматозоидов, иммунологическом конфликте по резус-фактору, не поддающемся лечению, наследственных генетически обусловленных заболеваниях в семье мужа (относительные показания). Противопоказания те же, что и к осеменению спермой мужа.

Искусственное осеменение спермой донора проводят после получения согласия обоих супругов. Донор должен быть моложе 36 лет, физически и психически здоров, не иметь наследственных заболеваний и нарушений развития, у родственников первой степени родства не должно быть более одного случая смерти плода и спонтанного аборта. Обязательно проведение реакции Вассермана и исследование на ВИЧ-инфекцию. При подборе донора учитывают резус- и групповую принадлежность крови, фенотип, в т.ч. телосложение, рост, цвет волос и глаз. Донор обязуется никогда не разыскивать своих биологических потомков с целью предъявления к ним каких-либо требований.

Перед осеменением необходимо проведение теста для выявления локальных антиспермальных антител к сперме донора и пробы на способность сперматозоидов проникать в шеечную слизь. Примерно у 1 / 3 женщин, которым ранее проводилось осеменение спермой донора, образуются локальные антиспермальные антитела; обнаружение их является показанием для внутриматочного введения спермы.

Для осеменения спермой донора может быть использована нативная или консервированная сперма. Наиболее распространенным методом консервации спермы является криоконсервация в жидком азоте, позволяющая создавать банк спермы и длительно хранить ее. По методике, рекомендуемой В.И. Грищенко и соавторами (1986), сперму замораживают в подключичном катетере, содержащем многокомпонентный консервант. Это уменьшает температурный градиент и создает благоприятные условия для сохранения и выживаемости сперматозоидов. Инсеминацию проводят с помощью того же катетера, что значительно упрощает процедуру. Техника введения спермы в половые пути женщины, методика стимуляции овуляции и желтого тела те же, что и при осеменении спермой мужа. В течение трех последовательных менструальных циклов следует применять сперму одного донора.

Частота наступления беременности после осеменения спермой мужа или донора примерно одинакова и достигает, по данным разных авторов, 30-70%. Женщины, забеременевшие после искусственного осеменения, должны находиться под наблюдением акушера-гинеколога женской консультации, так же как беременные с отягощенным акушерским анамнезом. Течение беременности и родов не отличается от таковых при нормальном зачатии, аномалии развития плода возникают не чаще, чем в популяции.

Экстракорпоральное оплодотворение с последующей трансплантацией эмбрионов и полость матки - один из современных методов лечения женского бесплодия. В мире насчитывается свыше 5 тыс. детей, родившихся после оплодотворения женщины с помощью этого метода.

В его применении достигнуты определенные успехи, но в связи с необходимостью использования дорогостоящей аппаратуры и оборудования, применения лекарственных препаратов в основном импортного производства в СССР он налажен только а крупных научно-исследовательских и клинических учреждениях.

Показания: абсолютное трубное (состояние после двусторонней тубэктомии); непроходимость или затруднение проходимости обеих маточных труб при отсутствии эффекта от ранее проведенного оперативного или длительного (более 5 лет) консервативного лечения, бесплодие, генез которого после проведенною полного клинического обследования (включая гормональное, эндоскопическое, иммунологическое) остается неясным; субфертильность спермы мужа (в случае неэффективности гомологического осеменения).

Условия проведения: сохраненная в полном объеме функциональная способность матки к имплантации эмбриона и вынашиванию беременности; отсутствие противопоказаний для беременности и родов (в связи с соматическими, психическими, генетическими заболеваниями женщины); сохраненная способность к адекватному ответу на экзогенную или эндогенную стимуляцию овуляции, отсутствие новообразований, воспалительных и анатомических изменений в органах малого таза.

Противопоказания: отсутствие перечисленных условий,

а также возраст женщины старше 40 лет.

Метод состоит из 5 этапов: 1) стимуляция суперовуляции (множественная овуляция); 2) аспирация яйцеклеток, 3) оплодотворение яйцеклеток; 4) культивирование оплодотворенных яйцеклеток, 5) перенос дробящихся эмбрионов в матку.

Успех метода в значительной мере зависит от числа яйцеклеток, полученных при пункции преовуляторных фолликулов, и от числа перенесенных в матку эмбрионов. В связи с этим необходима стимуляция суперовуляции путем комбинированного назначения антиэстрогенов (кломифенцитрата) и гонадотропинов (пергонала, хорионического гонадотропина). Б.В. Леоновым с сотрудниками разработаны следующие схемы стимуляции суперовуляции: первая схема - кломифенцитрат внутрь по 50-150 мг в день со 2-го или 3-го дня менструального цикла в течение 5 дней и пергонал по 75-150 ЕД внутримышечно на 3-й, 5-й, 7-й дни цикла и далее ежедневно до достижения доминантным фолликулом диаметром 16-18 мм ; вторая схема - пергонал по 75-150 ЕД внутримышечно со 2-го дня менструального цикла ежедневно до достижения доминантным фолликулом диаметром 16-18 мм . Через 24-48 ч после достижения фолликулом указанных размеров внутримышечно вводят 5000 - 10000 ЕД хорионического гонадотропина. По данным авторов, применение этих схем стимуляции суперовуляции приводит к образованию до 20 фолликулов, из которых может быть получено до 60 яйцеклеток.

Во время стимуляции суперовуляции женщина находится под постоянным динамическим контролем: ежедневное ультразвуковое исследование с измерением диаметра фолликулов, определение эстрадиола и лютеинизирующего гормона в крови.

Пункцию преовуляторных фолликулов проводят через 34-36 ч после введения хорионического гонадотропина. Ранее ее осуществляли трансабдоминально, а в последние годы выполняют через влагалище под контролем влагалищных ультразвуковых датчиков, что по сравнению с первым методом значительно облегчает визуализацию фолликулов и снижает частоту осложнений (ранение органов малого таза и крупных сосудов). Кроме того, трансвагинальное пунктирование фолликулов позволяет аспирировать яйцеклетки даже при выраженных спаечных процессах в брюшной полости. Внедрение этого метода дало возможность выполнять экстракорпоральное оплодотворение амбулаторно.

Яйцеклетки помещают в специальный термостат, в который переносят и сперматозоиды, полученные после промывания спермы мужа и отделения при центрифугировании семенной плазмы. На одну яйцеклетку добавляют 200-300 тыс. сперматозоидов. Процесс культивирования дробящихся яйцеклеток осуществляется в специальной среде при температуре 37°, абсолютной влажности, 5% содержании двуокиси углерода, обеспечивающем оптимальный уровень рН. На стадии 4 и более бластомеров дробящиеся эмбрионы помещают в специальный пластиковый катетер и через канал шейки матки вводят в полость матки (в область ее дна) в минимальном объеме (0,

05 мл ) питательной среды.

После трансплантации эмбрионов проводят динамическое определение b -субъединицы хорионического гонадотропина в крови, что помогает установить наступление беременности с 7-9-го дня после трансплантации. При наступлении беременности женщины постоянно наблюдаются акушером-гинекологом женской консультации, так же, как беременные с отягощенным акушерским анамнезом.

Эффективность метода повышается с совершенствованием аппаратуры и лекарственных препаратов для стимуляции овуляции. Неудачи метода могут быть обусловлены многими причинами, среди которых основными являются безуспешный перенос эмбриона в матку, нарушение функции желтого тела, образовавшегося на месте гиперстимулированного фолликула, изменения в эндометрии в результате применения антиэстрогенов, отсутствие синхронности между степенью зрелости эмбриона и эндометрия.

Частота внематочной беременности при этом методе составляет, по данным разных авторов, 2-10%, частота невынашивания беременности достигает 40%. Относительно чаще, чем в популяции, наблюдается гибель плодов в родах. Эти осложнения не являются следствием указанного метода, а связаны, несомненно, с возрастом женщин и наличием патологических изменений в их репродуктивной системе. Родившиеся дети развиваются обычно. Имеющиеся наблюдения о более быстром интеллектуальном и физическом развитии этих детей, очевидно, связано с особыми условиями их жизни и воспитания.

Трансплантация женских и мужских половых клеток в просвет маточной трубы осуществляется с помощью тефлонового катетера и пластикового зонда в качестве проводника, которые вводят через полость матки в просвет ампулы маточной трубы под контролем эхографии с применением влагалищного датчика. Через катетер шприцем вводят яйцеклетки (не менее трех) и 200-600 тыс. сперматозоидов в 50 мл питательной среды. При этом оплодотворение происходит в маточной трубе, что значительно физиологичнее, чем в пробирке. Метод признается достаточно перспективным для лечения бесплодия неясного генеза, бесплодия при некоторых формах а, а также бесплодия, обусловленного нарушением сперматогенеза у мужчин. Обязательным условием его применения является проходимость маточных труб.

Искусственное оплодотворение — это реальный шанс бесплодных пар обрести родительское счастье или противоестественная процедура, шансы успешности которой ничтожно малы?

Материнство — самое большое счастье и радость для женщины, ее призвание и наиболее естественное состояние. Когда же по каким-то объективным причинам женщина не может стать мамой, то на помощь приходит искусственное оплодотворение. Что же это такое, какие существуют методы искусственного оплодотворения, в чем особенности процедуры, а также другие волнующие женщин вопросы рассмотрим в этой статье.

Значение искусственного оплодотворения

Искусственное оплодотворение — это современный метод решения проблемы бесплодия, когда зачатие ребенка не может происходить естественным путем. Процедура искусственного оплодотворения может производиться по ряду причин, при которых бесплодием болен как один из партнеров, так и оба.

Основными показаниями к проведению искусственного оплодотворения являются:

  • поликистоз яичников
  • эндометриоз
  • низкое качество спермы партнера, которое может проявляться в малоподвижности сперматозоидов, их низкой концентрации и в большом количестве патологических единиц
  • гормональное бесплодие
  • трубное бесплодие
  • бесплодие, причины которого не установлены


Благодаря прогрессу в медицине сотни тысяч бесплодных супружеских пар наконец-то могут познать радость материнства и отцовства, ведь искусственное оплодотворение дарит возможность иметь детей при формах бесплодия, которые в прошлом ставили крест на репродуктивной функции.

Видео: Зачатие in vitro

Методы искусственного оплодотворения

Когда речь заходит об искусственном оплодотворении, то многие думают о распространенной и популярной процедуре ЭКО. На самом же деле существует несколько методов искусственного решения проблемы бесплодия:

  • ИСМ — метод, при котором внутрь матки женщины переносят сперматозоиды ее супруга. Данная методика применяется в случаях, когда репродуктивные функции женщины не нарушены и она не может стать матерью по причине низкого качества спермы мужа или когда слизь во влагалище женщины является агрессивной средой для существования сперматозоидов и они погибают так и не добравшись до яйцеклетки


  • ИСД — если сперма мужа непригодна к зачатию или он полностью бесплоден, то супругам предлагается метод искусственного оплодотворения спермой донора. Сама процедура данного метода практически не отличается от предыдущего: женщине так же вводят сперматозоиды в матку, но только донором спермы не является ее супруг


  • ГИФТ — когда причина бесплодия кроется в том, что яйцеклетка женщины не выходит в маточную трубу для оплодотворения, то эффективен метод интратубарного переноса гамет. Заключается он в переносе в маточную трубу предварительно взятой у женщины яйцеклетки, соединенной искусственным путем с мужскими сперматозоидами. Мужские половые клетки могут принадлежать как супругу, так и донору


  • ЗИФТ — метод, при котором в подготовленную гормонами матку вводят оплодотворенную яйцеклетку. Предварительно у женщины методом прокола яичника берут здоровую, пригодную для зачатия яйцеклетку и оплодотворяют ее вне женского организма сперматозоидами. После этого эмбрион вводится через шейку матки


  • ИКСИ — эффективный метод искусственного оплодотворения, который предполагает оплодотворение яйцеклетки сперматозоидом с помощью тончайшей иглы. Через прокол яичек изымается наиболее активный сперматозоид и внедряется в яйцеклетку


  • ЭКО — наиболее распространенный вид искусственного оплодотворения яйцеклетки вне организма женщины, после которого эмбрион имплантируется в матку


ЭКО метод оплодотворения

Экстракорпоральное оплодотворение — современная репродуктивная технология, к которой наиболее часто прибегают не только в нашей стране, но и во всем мире. Чем объясняется такая популярность метода? Во-первых, такая методика дает наиболее высокие результаты; во-вторых, с помощью ЭКО можно добиться беременности даже в очень сложных случаях бесплодия, когда оба партнера имеют серьезные проблемы репродуктивной функции.


Процедура искусственного оплодотворения

Для ЭКО необходимо наличие нескольких яйцеклеток. Но так как в организме женщины за один цикл может сформироваться только одна яйцеклетка, то количество выработки яйцеклеток стимулируется гормонами.

Когда с помощью УЗИ определяется, что яичник увеличен и в нем сформировались яйцеклетки, то их извлекают. После этого ооциты отмывают от фолликулярной жидкости и помещают в инкубатор, где яйцеклетки находятся до момента искусственного оплодотворения.

Если же получить яйцеклетки у женщины не удается, то используются донорские.


В этот же день осуществляется забор сперматозоидов, которые получают методом мастурбации или прерванного полового акта. В полученной сперме выделяют сперматозоиды и отбирают наиболее активные из них. После этого в пробирку с яйцеклетками добавляют необходимое количество активных сперматозоидов, в расчете 100-200 тыс. на яйцеклетку. Возможно также применение спермы донора.


В течении 2-3 часов сперматозоид оплодотворяет яйцеклетку. Далее, полученный эмбрион помещают в благоприятную среду, где он находится от 2 до 6 дней. Все это время в пробирку вводятся необходимые витамины, физиологические ионы, субстраты и аминокислоты. После этого производится непосредственный перенос эмбрионов в матку, который осуществляется за считанные минуты на гинекологическом кресле.

Если же женщина не может сама выносить беременность, то прибегают к суррогатному материнству.

Видео: Экстракорпоральное оплодотворение. Комаровский

Экстракорпоральное оплодотворение за и против

Несмотря на то что ЭКО открывает для страдающих бесплодием людей возможность иметь детей эта процедура может иметь также негативные последствия, которые иногда переходят в разряд плачевных:

  • нарушение гормонального фона
  • гиперстимуляция яичников
  • пороки развития плода
  • многоплодная беременность, при которой необходимо умерщвлять «лишние» зародыши для выживания хотя бы одного-двух


Кроме этого, процедура ЭКО дорогостоящее мероприятие, которое позволить себе могут далеко не все и, порой, бездетным парам приходится отказаться от любых надежд стать родителями, так как сумма для них просто неподъемная.

С другой стороны, в обществе существует предвзятое отношение к процедуре искусственного оплодотворения — «детей с пробирки» ошибочно принимают за неполноценных и отстающих в развитии.


Сегодня процедура ЭКО во многом совершенствуется. Применяются новые технологии, устанавливается точная дозировка гормонов, которая обеспечивает необходимые процессы и в то же время доставляет наименьший вред организму женщины.

Важно также, что крайне редко в полость матки помещается большое количество эмбрионов, как правило, только два, что предотвращает необходимость устранения лишнего зародыша. Да и сама радость материнства превышает все возможные риски и нежелательные последствия, которые может вызвать процедура ЭКО.

Сколько стоит искусственное оплодотворение?

Цена вопроса зависит от метода искусственного оплодотворения. Она может варьироваться в различных клиниках, но в среднем прейскурант выглядит так:

  • ИГО от 28 до 40 тыс. руб
  • ЭКО от 40 до 100 тыс. руб
  • ИКСИ от 100 до 150 тыс. руб


Другие же методы искусственного оплодотворения в России не распространены из-за более низкой эффективности.

Искусственное оплодотворение одиноких женщин

Женщинам, не имеющим партнера для зачатия ребенка, но отчаянно желающим завести дитя, поможет процедура искусственной инсеминации. В ходе этой процедуры в матку женщины помещаются активные сперматозоиды донора, после чего происходит оплодотворение яйцеклетки.

Непосредственно перед процедурой женщина проходит обследования и сдает анализы, при необходимости осуществляется гормональная стимуляция.


Искусственное оплодотворение в домашних условиях

Процедура искусственной инсеминации может проводиться и в домашних условиях. Ее суть заключается в том, что в матку женщины с помощью шприца и катетера вводится доза спермы, полученная при семяизвержении. Благодаря такой манипуляции в разы увеличивается шанс оплодотворения, ведь все сперматозоиды отправляются к яйцеклетке, тогда как при естественном оплодотворении часть семени выливается и нейтрализуется слизью влагалища, даже не попадая в матку.


Для осуществления искусственной инсеминации дома необходимы стерильные:

  • шприц
  • катетер
  • гинекологическое зеркало
  • пипетка
  • дезинфицирующее средство
  • тампоны
  • полотенце
  • гинекологические перчатки


Важно проводить процедуру во время овуляции, которую можно определить с помощью специального теста.

Проблема искусственного оплодотворения

Детальный инструктаж о том, как осуществляется искусственное оплодотворение дома можно узнать у гинеколога, но важно понимать, что осуществление такого важного процесса в домашних условиях может нести риск занесения в полость матки различных инфекций, в силу возможной нестерильности используемых приборов.

Искусственное оплодотворение: отзывы

Проанализировав отзывы женщин, решившихся на искусственное оплодотворение можно выделить несколько ключевых аспектов процедуры:

  • беременность наступает не всегда. Существуют пары, решившиеся на ЭКО пять-шесть раз подряд, но так и не достигшие желаемого
  • многих бесплодных женщин волнует моральный аспект, ведь проблема искусственного оплодотворения до сих пор вызывает дискуссии в различных кругах, в особенности со стороны церкви, которая считает подобные мероприятия противоестественными, а семьи, не имеющие детей, осуждает, так как они должны нести свой крест и не идти против воли Божьей


  • искусственное оплодотворение — колоссальная нагрузка на организм женщины как в моральном, так и физическом смысле
  • несмотря на проблемы, с которыми сталкиваются супружеские пары все же решившиеся на искусственное оплодотворение, положительный результат и радость иметь ребенка превышает все риски и отрицательные моменты и многих останавливает только цена процедуры от того, чтобы завести ребенка искусственным путем повторно

Видео: Виды искусственного оплодотворения

Непосредственно ЭКО проводится врачами-эмбриологами в условиях эмбриологической лаборатории. Собственно оплодотворение проводят одним из двух способов:

1) инсеминация in vitro;

2) интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ICSI, ИКСИ).

При первом, более простом способе к яйцеклеткам, которые находятся в питательной среде, добавляют суспензиюсперматозоидов. Сперматозоиды добавляют из расчета 100--200 тыс. на одну яйцеклетку. В течение 2--3 часов один из сперматозоидов проникает в яйцеклетку и тем самым оплодотворяет её. При втором способе (ИКСИ) сперматозоид вводят в яйцеклетку «вручную» с помощью микрохирургических инструментов. ИКСИ используют при очень плохом качестве спермы, когда оплодотворение не может быть получено даже в чашке.

После проникновения сперматозоида яйцеклетка считается эмбрионом. Вероятность успешного оплодотворения 60--70%. Эмбрионы содержат в искусственных условиях от 2 до 6 дней. Для этого используют так называемые СО 2 -инкубаторы -- шкафы, в которых поддерживается температура 37°C и содержание СО 2 в атмосфере 5--6%. Эмбрионы (а до этого яйцеклетки) в инкубаторах непосредственно содержат в пластиковых чашках (чашки Петри, чашки Нунка, планшеты и пр.) с культуральной средой. В культуральную среду для эмбрионов входят основные физиологические ионы (Na + , K + , Ca 2+ , Mg 2+ , C l- , CO 3- и т. д.), энергетические субстраты (глюкоза, пируват, лактат), аминокислоты, часто витамины и белки сыворотки крови. За время инкубации эмбрион человека практически не увеличивается в размере (первые 4 дня его размер 0,1 мм, на 5 день 0,15--0,2 мм), но количество клеток, его составляющих, возрастает многократно (1 день -- 1 клетка; 2 день -- 4 клетки; 3 день -- 8 клеток; 4 день -- от 10 до 20 клеток, 5 день -- от 40 до 200 клеток). Перенос эмбриона в матку осуществляют через 2--5 дней после оплодотворения яйцеклетки. Процедура не требует анестезии (обезболивания) и выполняется на гинекологическом кресле в течение нескольких минут. Эмбрион переносят в матку, проводя через шейку матки специальный эластичный катетер. Согласно приказу № 67 Минздрава РФ в полость матки не рекомендуется переносить более 4 эмбрионов, чтобы избежать многоплодной беременности. Современная практика ЭКО в России такова, что обычно осуществляют перенос 2 эмбрионов. При невозможности вынашивания плода пациентка может прибегнуть к использованию суррогатной матери.

Заключение

На сегодняшний день в клиниках замораживают (криоконсервируют) половые клетки человека (сперматозоиды, ооциты), и эмбрионы на различных стадиях развития, полученных в результате программ ЭКО. Замораживают оставшиеся после переноса в «свежем» (то есть, стимулированном) цикле эмбрионы только хорошего качества, т.к. впоследствии они благополучно перенесут разморозку.

Замораживание спермы применяют в случаях: раковых заболеваний у мужчин с целью обеспечения запасов спермы до начала химиотерапии и последующего использования замороженного образца для получения здорового потомства, неуверенности наличия партнера во время сбора спермы для ЭКО -- ситуация, характерная для иногородних пациентов, донорства, в случаях планированного отложенного отцовства. Возможно, в связи с заметным снижением мужской фертильности, запасание впрок спермы молодых мужчин будет популяризироваться.

Замораживание яйцеклеток применяют в случаях, когда стимуляция не рекомендуется или противопоказана (например, онкологические и др. заболевания) или же невозможно провести оплодотворение клеток в данный период. Зрелый ооцит (женская клетка) крайне хрупкий из-за большого размера, жидкого содержимого и расположения хромосом и во время процедур замораживания/размораживания легко повреждается. Частота родов после оплодотворения и инсеминации замороженных-размороженных ооцитов составляет 3-4%. С помощью криоконсервации решается проблема зачатия и бесплодия. Кроме лечения многих форм мужского и женского бесплодия, ВРТ используются и для решения проблем фундаментальной биологии и медицины. Используя не затребованные для имплантации эмбрионы, изучают механизмы оплодотворения и развития эмбриона, генетическую регуляцию эмбриогенеза, возможности преимплантационной диагностики наследственных заболеваний и другие проблемы. Сперму пациент получает самостоятельно с помощью мастурбации. Возможно использование прерванного коитуса, либо медицинского презерватива без смазки. В случае невозможности получения спермы путем эякуляции, используют хирургические методы: аспирация содержимого эпидидимиса, биопсия яичка и прочее. Сперму получают в день пункции фолликулов супруги. Если получение спермы в день пункции невозможно, то используют предварительное получение спермы с последующим замораживанием и хранением в жидком азоте. Перед оплодотворением яйцеклетки сперматозоиды отмывают от семенной жидкости и с помощью специальных методов выделяют наиболее качественные из них.

При невозможности использования спермы мужа или при отсутствии у пациентки полового партнёра, возможно использование спермы донора. Использование спермы донора производится при обязательном письменном согласии супруга и регламентируется приказом N107Н Минздрава РФ. Согласно этому приказу сперма донора используется после 6-тимесячного карантина, т.е. через 6 месяцев хранения в замороженном состоянии и повторного обследования донора, подтверждающего отсутствие инфекционных заболеваний.